Expressão imunoistoquímica e molecular da laminina-332 cadeia gama-2 em tumores mamários de cadelas / Immunohistochemical and molecular expression of laminin-332 gamma-2 chain in canine mammary tumors

Forty-eight cases of canine mammary cancer were investigated to evaluate the immunohistochemical distribution of the γ2 chain of laminin-332. Tumor cells were compared to a pool of normal mammary tissues using quantitative RT-PCR. The western blot was performed in eight tumor samples as complementary test to evaluate protein integrity. Immunohistochemistry experiments showed negative, focal, and weak expression of laminin-332 γ2 in tumors with the worst prognosis. Quantitative PCR revealed downregulation of the gene in 27 (56.2 percent) of the animals. Out of the 16 dogs with γ2 chain overexpression, seven were still alive. The western blot results showed bands generation of 36, 50, and 98kDa, suggesting degradation of laminin-332 γ2 in malignant tumors. The results suggest that, in the future, low expression and/or degradation of laminin-332 γ2 chain in canine mammary tumors may be used as an indicator of malignant potential. However, further studies are necessary to corroborate these results.

Para avaliar a expressão imunoistoquímica da cadeia γ 2 da laminina-332, foram investigados 48 casos de câncer mamário canino. Comparou-se, por RT-PCR, a expressão gênica nas células tumorais com um pool de tecido mamário. Como teste complementar, em oito amostras tumorais, realizou-se western blot para avaliar a integridade da proteína laminina-332 γ 2. A imunoistoquímica demonstrou expressão negativa, focal e fraca da laminina-332 γ 2 nos tumores com pior prognóstico. A RT-PCR quantitativa revelou a baixa expressão do gene em 27 (56,2 por cento) dos animais. Das 16 cadelas com superexpressão da cadeia γ 2, sete ainda estavam vivas no final do estudo. O resultado do western blot mostrou bandas de 36, 50 e 98kDa, sugerindo uma degradação da laminina-332 γ 2 em tumores malignos. Os resultados sugerem que, no futuro, a baixa expressão e/ou degradação da laminina-332 γ 2 nos tumores mamários caninos podem ser utilizadas como indicadores de potencial maligno. No entanto, mais estudos são necessários para confirmar estes resultados.

Expressäo dos filamentos intermediários no diagnóstico dos tumores mamários de cadelas / Expression of intermediate filaments in canine mammary tumors diagnosis

Foram utilizados anticorpos monoclonais para marcaçäo imunoistoquímica dos tecidos tumorais e obtençäo de informaçöes sobre a histogênese dos tumores mamários utilizando-se anti-citoqueratinas para marcaçäo de células epiteliais, e anti-actina e anti-vimentina para células mioepiteliais. O procedimento imunoistoquímico mostrou-se esclarecedor com relaçäo à histogênese dos tumores mamários, confirmando a marcaçäo de células epiteliais com as citoqueratinas que perdem sua expressäo na transformaçäo celular maligna. A alfa-actina e a vimentina mostraram-se eficientes na marcaçäo de células mioepiteliais. A alfa-actina diminuiu a marcaçäo na metaplasia óssea ou cartilaginosa contrariamente à vimentina cuja marcaçäo foi aumentada. Os resultados permitem melhor entendimento da classificaçäo dos tumores mamários de cadelas com a utilizaçäo de anticorpos monoclonais como marcadores do citoesqueleto, que se mostraram eficientes nessa caracterizaçäo